PAC文库-(基于pESAC13载体)


        我们是PAC库(基于pESAC13系列载体)的全球独家供应商。这种独特的载体(由NAICONS独家授权给Bio S&T)可用于构建链霉菌属和放线菌属菌种的基因文库,非常适合用于生物合成途径所需的基因簇克隆与筛选。

        ESAC(大肠杆菌 — 链霉菌人工染色体)载体是一种可以在大肠杆菌和链霉菌宿主之间穿梭的细菌人工染色体,在大肠杆菌中它可以自由地复制,而在链霉菌宿主中它可以特异性地整合到宿主的基因组中。

         pESAC13载体是pPAC-S1载体的衍生系列,它是由ESAC的最初发明者(Sosio等人,2000)之一发明的,他通过将一段来自RK2复制子(Simon等人,1983)的含有oriT的760bp的DNA片段插入到pPAC-S1的BstXI位点(M.Sosio等人,未公开)中来获得该载体。

          pESAC13的重要优点是由它构建而来的文库中的克隆子可以从大肠杆菌中共轭转移到若干个种属的链霉菌或者依稀非链霉菌的放线菌中,而不需要通过先纯化克隆质粒然后原生质体介导转化的方法。



                     图1. pESAC 载体图谱

          

我们的承诺


▇  HMW DNA分离被包括在内。

▇  文库采用pESAC13载体(BamHI内切酶)和DH10B细胞构建。

▇  提供一个最少20X的PAC文库,且目标序列发现概率>99.99%;保证覆盖率和120Kb平均大小的插入片段。

▇  克隆将在5*384孔板中进行排列和扩增(1克隆/孔)。

▇  包括通过HMW DNA酶消化的QC,使用随机选择的克隆评价质量控制(平均插入片段大小和空克隆的百分比)。

▇  我们会为所有的池化BAC文库做一份拷贝并且免费保存,未来客户如果需要这份拷贝时仅需支付相应的运输费用即可。



我们的强项


 ❉  我们保证文库覆盖率。

 ❉  高的平均插入片段和插入片段大小分布(见以下图表1)。

 ❉  用我们自己的设备进行高分子量DNA的抽提。

 ❉  我们有着构建植物、真菌、细菌和动物文库的经验。

 ❉  我们有着处理高GC含量的生物和海洋细菌的经验。

 ❉  我们有着运往世界各地的丰富的运输经验。

 ❉  始终使用BLUE FLAG温度数据记录器监视文库产品的运输温度。

 ❉  PAC库是客户的财产,从不在内部使用,销售或分发。

 ❉  我们提供技术支持和文献支持。

 ❉  我们提供论文的外文润色服务


Table 1: A few PAC libraries constructed in the past with obtained average insert sizes.

Starting material Average Insert size
Streptomyces sp. 130 Kb
Streptomyces sp. 145 Kb
Streptomyces sp. 125 Kb
Actinomycete sp. 155 Kb
Streptomyces sp. 139 Kb


Figure 2: PFG following DraI digestion of PAC clones (Actinomycete sp.) with an average insert size of 155Kb.

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