筛选/池化BAC文库(Screened & Pooled)

       

        自1997年以来,我司一直在构建高质量的cDNA和DNA文库,我们的客户包括加拿大农业部,先锋国际(杜邦),拜耳,嘉吉和德国马克斯普朗克研究所。我们保证实验周期短,价格优惠、插入片段大。

        池化BAC文库是PCR筛选中的一个很重要的工具,它可以让科研人员很容易地筛选到目标BAC克隆。这种类型的文库对于大基因组的筛选非常有用,因为构建一个阵列的文库成本昂贵。

        池化BAC库具有独特的优势:

❉  池化文库以一种紧凑的方式保存、节省保存空间;

❉  池化文库保存时间长,可以无限期存储;

❉  池化文库可以多数重复利用,能筛选数百次;

❉  池化文库的拷贝容易获得;

❉  池化文库非常经济实惠,节省构建成本;

 

我们的承诺


▇  通常我们会建立一个至少5倍覆盖度的BAC文库,这样保证了99.3%的发现目标序列的概率。还可以提供其他倍数的覆盖度的BAC文库或者2-酶切BAC文库构建服务(另外计费)。我们也可以按客户的需求来调整我们的服务

▇  BAC克隆将会被池化分布并扩增并在96孔板中。例如:一个基因组大小为3Gb的物种所建立的BAC文库将会含有至少125,000个BAC克隆(平均插入片段125Kb),这些克隆分布于3个96孔板里,每个孔里将含有约400-500个原始BAC克隆。

▇  文库的覆盖率是有保证的,客户收到的克隆都是基于我们承诺的覆盖率和120kb的平均插入片段。如果插入的片段小于120kb,我们会增加克隆的数量。

▇  HMW DNA分离和基于HMW DNA酶消解法的质量控制都包含在内。

▇  我们会为所有的池化BAC文库做一份拷贝并且免费保存,未来客户如果需要这份拷贝时仅需支付相应的运输费用即可。


我们的相关服务


★  阳性克隆筛选:可以使用客户提供的PCR引物对池化BAC文库进行PCR筛选,所述PCR引物可用于特异性扩增靶区域中的某一片段。 每次筛选的价格取决于基因组大小。 客户可以决定他想要购买的阳性BAC克隆的数量。

★  从池BAC库衍生的行和列池构建: 我们还可以提供以下池共客户选择,以便客户可以在接收到产品的第一时间内进行筛选

1、从超级池中得到的行池:甘油保存菌+质粒DNA。

2、从超级池中得到的列池:甘油保存菌+质粒DNA。


我们的强项


 ❉  我们保证文库覆盖率。

 ❉  高的平均插入片段和插入片段大小分布(见以下图表1)。

 ❉  用我们自己的设备进行高分子量DNA的抽提。

 ❉  我们有着构建植物、真菌、细菌和动物文库的经验。

 ❉  我们有着处理高GC含量的生物和海洋细菌的经验。

 ❉  我们的阵列BAC文库是用带条形码的微孔板来运输。

 ❉  我们有着运往世界各地的丰富的运输经验。

 ❉  始终使用BLUE FLAG温度数据记录器监视文库产品的运输温度。

 ❉  BAC库是客户的财产,从不在内部使用,销售或分发。

 ❉  我们提供技术支持和文献支持。

 ❉  我们提供论文的外文润色服务


Table 1: A few libraries constructed in the past with obtained average insert sizes.

Starting material Insert size
Musmusculus 180 Kb
Zea mays 150 Kb
P. brassicacearum 160 Kb
P. omnivore 185 Kb
Arabidopsis thaliana 150 Kb
Homo sapiens 215 Kb


Figure 1: PFG following NotI digestion of insect BAC clones ( Mamestra configurata) with an average insert size of 178Kb

Insect

Figure 2: PFG following NotI digestion of fungal BAC clones P. omnivora) with an average insert size of 185Kb.

fungal

Graph 1: BAC clone insert size distribution (average of 140Kb) of a Soybean BAC library (Glycine max).